活细胞富集
优质样本的价值
在细胞生物学中，下游检测结果高度依赖于所用初步样本的质量。质量差的样本——如含有大量死亡细胞和碎片——会产生差的结果。起始样本的基本质量最终决定了结果的质量，而样本制备步骤通常是实现成功最困难的环节。
通过利用LeviCell®平台进行细胞分离，科学家们已经持续证明了对于广泛的目标细胞的强大富集能力——不会影响细胞表达或原始群体代表性。这种创新的悬浮技术™可以无缝应用于广泛的科研领域和工作流。
准备是关键
传统上用于从混合细胞群中分离特定细胞类型的方法包括磁珠、梯度纯化和流式细胞术。尽管这些技术被广泛使用，但它们并不一定是富集目标细胞群体的最有效或最理想的方法。
使用这些方法困扰科学家们的常见问题包括对细胞施加人造压力，这不可避免地导致其表达谱的改变（Van Den Brink等人，2017年），抗体诱导的细胞内信号传导（Kornbluth和Hoover，1989年；Christaki等人，2011年），以及渗透压和压力引起的多种细胞类型的细胞表达谱变化（Xiong等人，2002年；Romero-santacreu等人，2009年；Van Den Brink等人，2017年）。
这些问题并非被轻视，因为它们是有代价的：获取难以获得的样本、材料和劳动力的费用；挫败感的无法估量的成本；以及时间的不可替代的费用。为此，LeviCell是一个变革者。
悬浮技术
LevitasBio® 开发了一种创新悬浮技术平台，该平台使用不到1磅每平方英寸（psi）的压力来实现无接触、无标签的三步富集过程，整个过程只需20分钟即可完成。
活细胞群比死细胞和碎片悬浮得更高，如所示，这使得LeviCell能够实现清晰的分离和收集。提供的图片中使用的荧光染料仅用于突出显示分离过程，并非使用LeviCell系统的必要条件。
LeviCell温和的细胞分离技术能够保持最大的细胞活性，从而在下游实验中如单细胞分析，维持细胞群代表性的完整性。简单的三步操作流程简化了工作流，并最大限度地减少了因多次处理和洗涤而导致的污染和损伤风险，从而最大化每种细胞类型的富集效果。
步骤1 输入
通过添加悬浮剂（一种顺磁性溶液）来制备样品。将卡插入系统后，将样品滴入进料孔中。
步骤2 富集
步骤3 收集
一旦细胞悬浮到最终平衡位置，软件中的实时视图使用户能够定义如何划分样本（感兴趣的部分和废弃部分）。分离的各部分被收集到卡盒出口孔中。
结果
初级样本在LeviCell系统上处理，并采用领先供应商提供的最常见的珠基方法。这里呈现的两种方法的实验结果是通过手动计数活细胞和死细胞来计算产量和活性。
革命性的可行性和产量
LeviCell成功地从各种原代样本中去除死细胞和碎片，同时保持了样本内发现的人群的原始代表性。此外，LeviCell能够将低起始数量的活细胞富集到最终存活率>90%，展示了可扩展性，无论起始细胞数量多少。通过在3个步骤和20分钟内去除死细胞和碎片，两个解离肿瘤细胞（DTCs）的每个100,000个细胞都成功地处理并富集到最终存活率>90%。
可行性对比癌症及分数
比珠子基方法具有更优越的性能
可行性与排序方法及排序
产出与排序方法
使用30 mM的悬浮剂实现了分化和非分化脂肪细胞之间的最大悬浮高度差（图A）。随着悬浮剂浓度的增加，两组细胞的总体悬浮高度增加，而分化和非分化的细胞之间的距离减小。
对后处理人口代表性没有负面影响
右侧的数据显示了LeviCell温和的细胞分离方法如何使人们能够研究那些众所周知非常脆弱和敏感的原代细胞类型，同时不会损害原始细胞群的完整性。经过分选和未分选的卵巢DTC样本在室温下用TruStain人Fc阻断剂封闭15分钟，然后用5μL的抗CD45、抗CD19、抗CD11b以及10μL的抗CD3染色30分钟。在用FACS缓冲液（PBS中含0.5%牛血清白蛋白）洗涤一次后，使用索尼SH800S流式细胞仪进行分析。LeviCell的结果显示CD45+淋巴细胞群中CD3+、CD19+和CD11b+细胞的含量相似，而通过珠子法处理的样本显示出CD3+和CD11b+细胞的比例减少。
对后处理激活状态无影响
巨噬细胞是最敏感的细胞类型之一，这表明了LeviCell系统的温和性。下面的数据确认了在细胞的后期处理激活状态上没有不良副作用。
LeviCell独特的悬浮平台使科学家能够通过将特定细胞类型的富集时间从数小时甚至数天缩短到仅仅几分钟，从而显著降低成本（包括财务成本）。
LeviCell系统简化了工作流程，减少了高度专业技术人员和复杂单细胞制备协议的需求。由于LeviCell系统不使用任何高压、标签、染料或抗体来分离细胞，因此不会改变表达谱。LeviCell的封闭环境还消除了手动操作引起的污染和细胞死亡的风险。将活细胞与死细胞和碎片分开就像在它们之间找到分界线一样简单。